| 产品名称 |
人卵巢癌组织源性原代细胞 |
| 商品货号 |
MZ-4278 |
| 组织来源 |
中国成年病人手术后的卵巢癌组织。 |
| 规格 |
5×105cells/T25培养瓶 |
| 生长特性 |
贴壁 |
| 细胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 细胞传代步骤 |
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤 |
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤 |
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 病理分类 |
1、浆液性囊腺癌为恶性卵巢肿瘤最常见者。2/3 为双侧性，其癌细胞常以形成囊腔和乳头 为特征，但或多或少仍保留原来的组织形态。有的形成大量有规则小囊腔，有时上皮突入腔 内形成上皮簇或乳头的倾向。 组织分级：高分化（Ⅰ级）、中分化（Ⅱ级）、低分化（Ⅲ级）。 2、粘液性囊腺癌多房性较多，双侧虽不多，但在卵巢粘液性肿瘤中较良性多，约有5%～ 40%。外观光滑、圆形或呈分叶状，切面囊性、多房，伴有实性区域。囊内壁可见乳头，但 较浆性癌少。囊腔内含血性胶状粘液，实性区常见出血坏死。镜下特点为：①上皮复层超过 3 层；②上皮重度非典型增生，伴有粘液分泌异常；③腺体有背靠现象；④核分裂活跃；⑤ 间质浸润。 组织分级： （1）高分化（Ⅰ级）：上皮高柱形，上皮增生超过3 层。乳头分支细长，形态不规则，间质 极少。乳头表面细胞失极性，排列紊乱，核大小不等，分裂相多。有时粘液分泌过多逸出细 胞外，使细胞质界限消失。 （2）中分化（Ⅱ级）：上皮柱状或低柱状，形成共壁，细胞内有少量粘液，间质内有大量细 胞巢浸润，核分裂相较多。 （3）低分化（Ⅲ级）：腺样结构不明显，上皮细胞呈簇状或弥漫性生长，细胞核异型性明显， 核分裂相更多。细胞内粘液极少。 3、恶性宫内膜样癌肿瘤55%～60%为单侧，囊实性或大部分实性，囊液多为血性，有时伴 有巧克力囊肿。外形光滑或结节状，或有表面乳头生长。镜下表现与子宫内膜癌相似，常见 鳞状上皮化生。根据腺体形态排列结构及细胞分化程度，肿瘤可分成3 级： （1）高分化（Ⅰ级）：分化较好，以腺体结构为主，有少量核分裂相。 （2）中分化（Ⅱ级）：实性部分占1/2，腺体形态不规则，有多量小腺体彼此相连，核分裂 相明显。 （3）低分化（Ⅲ级）：腺体结构已很少见，肿瘤细胞大量增生，破坏了腺腔，形成弥漫一片， 核分裂相增多。 4、恶性透明细胞瘤多为囊实性，质韧不十分硬，大小不等，单侧多，双侧可达24%。切 面呈鱼肉状，或淡黄色。常伴有出血坏死。仔细检查，常可发现子宫内膜异位。镜下可见透 明细胞、鞋钉细胞及嗜酸性粒细胞。细胞核有异形，可见核分裂相。 5、未成熟畸胎瘤肿瘤多为单侧巨大肿物，包膜光滑，但常与周围组织有粘连或在手术中易 撕裂。切面多以实性为主，伴有囊性区；偶见以囊为主者，囊壁有实性区域。实性区质软、 细腻、有出血坏死呈杂色多彩状，有时见骨、软骨、毛发或脑组织；囊性区通常充以浆液、 粘液或胶冻样物。 镜下见肿瘤由来自三胚层的成熟和未成熟组织构成；外胚层主要是神经组织和皮肤，中胚层 以纤维结缔组织、软骨、骨、肌肉和未分化的间叶组织为多见，内胚层主要为腺管样结构， 有时可见支气管或胃肠上皮。这些组织处于不同的成熟阶段，无器官样排列。未成熟组织主 要是指神经上皮组织，可形成菊形团或神经管结构，也可弥漫成片。根据肿瘤中这种神经上 皮的含量，Norris 等（1976）提出未成熟畸胎瘤的分级方法，这种分级对治疗和预后判断均 有重要意义。 0 级：全部为成熟组织。 Ⅰ级：有少量不成熟组织（主要是胶质和原始间充质），可见核分裂。神经上皮少，每一切 片中仅限于1 个/40 倍视野。 Ⅱ级：有较多未成熟组织，每一切片中神经上皮的量占4 个或更多/40 倍视野，并常与肉瘤 样的间质融合。 6、无性细胞瘤肿瘤多为单侧，中等大小，呈圆形、分叶状，包膜光滑，切面灰白色、质实， 可有坏死出血。镜下见被结缔组织分隔的大圆形或多角形细胞群，周围有淋巴细胞浸润。此 瘤常出现各种性腺功能低下或雌雄间体现象。 7、卵巢内胚窦瘤（卵黄囊瘤） 多数为单侧，双侧多为转移所致。肿瘤通常体积较大，直径 多超过10cm，呈圆形或卵圆形，表面光滑，包膜完整，切面灰白，组织脆，间质有胶状粘 液，伴出血，坏死，易破裂。镜下结构复杂，主要为疏松网状结构和内胚窦样结构。瘤细胞 呈扁平、立方、柱状或多角形。 8、颗粒细胞瘤最常见的一种卵巢性索间质肿瘤。为低度恶性肿瘤。多为单侧，大小不一， 表面光滑或分叶状，切面实性，色淡黄，一部分呈囊性变，有时有出血坏死。组织学特点是 颗粒细胞围绕小囊呈放射状排列。颗粒细胞瘤具有内分泌功能，分泌雌激素，青春期前出现 假性早熟，生育年龄引起月经紊乱，绝经期后内膜增生过长，甚至发生腺癌。 |
