| 产品名称 |
人肝癌组织源性原代细胞 |
| 商品货号 |
MZ-4267 |
| 组织来源 |
中国成年病人手术后的肝癌组织 |
| 规格 |
5×105cells/T25培养瓶 |
| 生长特性 |
贴壁 |
| 细胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 细胞传代步骤 |
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
| 细胞复苏步骤 |
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞冻存步骤 |
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 组织学分型 |
1.弥漫型表现为均匀散在微小结节，分布于整个肝脏，结节大小较一致，一般不超过肝小 叶的大小，几乎总是和肝硬化同时存在，肝脏正常或略小，与肝硬化不易区别，是较少见的 一型，约占原发性肝癌的5%，发展快，预后差。 2.块状型可分为单纯块状型、融合块状型及多块状型。单纯块状型，癌肿为单个肿块，边 界清楚或不规则，常有完整或不完整包膜，有的可无包膜，肿块边缘常可见小的卫星癌结节。 融合块状型，可见以癌块为中心向周围呈浸润性生长，并与邻近之大小癌结节。多块状型为 两个以上的单块或融合块，本型约占原发性肝癌的30%，因多伴有肝硬化，预后较好。 3.结节型肿瘤为多数大小不等的结节，突出在肝脏表现，遍及全肝，多并发肝硬化。肿瘤 结节呈灰白色或灰黄色，也可呈棕红色。本型可分为单结节型、融合结节型及多结节型。本 型约占全部肝癌的2/3，预后较差。 4.小癌型指癌肿直径在5cm 以下（有人认为在3cm 以下），且为单个存在，一般有完整的 包膜，恶性程度低，基本上是早期肝癌。手术切除率高，预后好。 |
| 组织学分类 |
肝细胞癌 胆管细胞癌 混合型肝癌 纤维板层型肝癌 |
