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SF188
SF188
价格:询价
货期:
编号:MZ-0434
品牌:Mingzhoubio

活化细胞
冻存细胞
荧光标记细胞
细胞沉淀

规格:
T25瓶
冻存管
1亿
5亿
10亿

产品名称
SF188
商品货号
MZ-0434
中文名称
人胶质母细胞瘤细胞系
培养基
组织来源
8岁男性 右额叶肿瘤
形态特征
上皮细胞样
细胞污染
HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件
气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
生长特性
贴壁生长
冻存条件
90%血清,10%DMSO,现用现配。
传代方法
1:2传代
特征特性
SF188胶质母细胞瘤细胞系来自一名8岁男性患者的右额叶肿瘤,SF188细胞不表达神经胶质标志物GFAP或谷氨酰胺合成酶,但在早期传代中对层粘连蛋白和纤连蛋白表达呈阳性,提示胶质母细胞瘤的增殖或转化间充质细胞, SF188细胞在培养中表现出高三倍体和上皮形态,并且在无胸腺小鼠中不致瘤。SF188细胞系具有增殖因子c-myc的遗传扩增。多形性胶质母细胞瘤是最常见和恶性的原发性脑肿瘤,复发率高,五年生存率低于5%。胶质母细胞瘤约占儿童脑肿瘤的10%,儿童形式的胶质母细胞瘤通常具有不同于成人形式的特征。胶质母细胞瘤是最具侵袭性的癌症形式,凸显了相关人类患者来源细胞模型对推进该疾病特征和治疗研究的重要性。
细胞冻存步骤
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
复苏细胞步骤
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代步骤
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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