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UM-UC-14
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0574-87157013
mingzhoubio@163.com
浙江省宁波市镇海区庄市街道兴庄路9号
创e慧谷42号楼B幢401室
UM-UC-14
UM-UC-14
规格:
货期:
编号:MZ-8383
品牌:Mingzhoubio
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T25瓶
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商品简介
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产品名称
UM-UC-14
商品货号
MZ-8383
中文名称
人肾癌细胞
组织来源
肾脏
形态特征
上皮细胞样
生长特性
贴壁生长
特征特性
Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,11;D3S1358:14,17;D5S818:11,12;D7S820:9,12;D8S1179:13,15;D13S317:12;D16S539:12,13;D18S51:12,15;D21S11:30.2,31.2;FGA:24,25;PentaD:9,14;PentaE:12,18;TH01:9.3;TPOX:8,11;vWA:15,17
细胞污染
HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
培养条件
UM-UC-14人肾癌细胞专用培养基
传代方法
每2-3天换液一次
细胞冻存步骤
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
复苏细胞步骤
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞传代步骤
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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