| 产品名称 |
永生化人支气管平滑肌 |
| 商品货号 |
MZ-8363 |
| 中文名称 |
永生化人支气管平滑肌 |
| 组织来源 |
原代人支气管平滑肌 |
| 形态特征 |
人支气管平滑肌细胞分离自支气管组织；支气管由三层组成：①粘膜层为支气管最里面的一层，上面覆有粘膜，为假复层柱状纤毛上皮细胞。上皮细胞之间夹杂有杯状细胞。②粘膜下层为疏松结缔组织，其中含有较多的气管腺。③外膜由透明软骨和纤维组织构成。气管软骨呈马蹄形，缺口位向背侧，由平滑肌束和结缔组织构成的膜壁封闭。膜壁内的平滑肌束多呈横行排列，当平滑肌收缩时，可使气管变细，气管软骨之间由韧带相连，外面包裹有结缔组 |
| 细胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
| 培养条件 |
永生化人支气管平滑肌专用完全培养基 |
| 细胞冻存步骤 |
待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入2ml完全培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。明舟生物按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
| 复苏细胞步骤 |
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 |
| 细胞传代步骤 |
如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 |
