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SD大鼠脂肪干细胞+RFP
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MZ-M2000

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产品名称: SD大鼠脂肪干细胞+RFP
商品货号: MZ-M2000
组织来源: 实验动物的正常脂肪组织。
规格: 1×106cells/T25培养瓶
细胞形态: 梭形、多角形
培养基: 原代间充质干细胞培养体系
细胞污染: HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。
细胞描述: 根据不同来源及分化阶段,干细胞可分为胚胎干细胞和成体干细胞胚胎干细胞具有分化为多种不同组织的能力,但在伦理上存在争议。成体干细胞因其来源广泛、增殖能力强等特点,现已成为组织工程学研究的首选种子细胞。其中,脂肪干细胞作为组织工程修复的种子细胞,因其具有来源丰富、取材容易、增殖能力强等优点,正受到越来越多的关注。 脂肪干细胞形态类似成纤维细胞,具有较强的增殖能力。在一定的诱导条件下,可分化为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、上皮细胞等,具有多向分化潜能。 该细胞通过慢病毒转染的方式携带RFP基因,稳定表达RFP蛋白。
细胞传代步骤: 如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤: 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。