产品名称 |
P815(P-815) |
商品货号 |
MZ-0142 |
中文名称 |
小鼠肥大细胞瘤细胞 |
细胞数量 |
1*10^6 |
组织来源 |
肥大细胞瘤;雄性;DBA/2 |
细胞种属 |
Homo sapiens, human |
细胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测阴性。 |
生长特性 |
mixed, adherent and suspension |
培养基 |
DMEM+10% FBS+1% P/S |
形态特征 |
rounded |
传代方法 |
Cultures can be maintained by addition or replacement of fresh medium. Start cultures at 2×10^5 cells/mL and maintain between 1×10^5 and 1×10^6 cells/mL. Adherent cells can be recovered by scraping. |
培养条件 |
Atmosphere: Air, 95%; CO2, 5%。Temperature: 37℃ |
细胞描述 |
该细胞源自DBA/2小鼠的肥大细胞瘤;可吞噬乳胶微球,但不吞噬酵母聚糖或卡介苗,没有抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。硫酸右旋糖酐、LPS或PPD不能抑制细胞生长;产生溶菌酶;鼠痘病毒阴性。 |
细胞传代步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中 |
复苏细胞步骤 |
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。 |
细胞冻存步骤 |
:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例;1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
细胞冻存 |
Freeze medium: 50% basal medium+40% FBS+10%.DMSOStorage temperature: liquid nitrogen vapor phase |
细胞运输 |
干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25细胞瓶) |