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人牙周膜成纤维细胞

一、产品简介

1. 产品名称:人牙周膜成纤维细胞

2. 组织来源:牙周膜组织

3. 产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4. 人牙周膜成纤维细胞简介:

人牙周膜成纤维细胞分离自牙周膜组织;牙周膜(牙周韧带、牙周间隙)是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束,纤维的一端埋于牙骨质内,另一端则埋于牙槽窝骨壁里,使牙齿固位于牙槽窝内;牙周膜内有神经、血管、淋巴和上皮细胞等。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的牙周膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。人牙周膜成纤维细胞PLFs)作为牙周膜的主体细胞,是牙周膜主要的间质细胞,它不仅具有合成胶原、基质、弹力纤维和糖蛋白的功能,还有吸收胶原吞噬异物的能力,还参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在,利用牙周膜细胞建立体外模型,已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。明舟生物生产的人牙周膜成纤维细胞采用胶原酶-胰蛋白酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶;细胞Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

5. 培养基信息:

DMEM[H]FBS、成纤维细胞生长添加剂、PenicillinStreptomycin等 我们推荐使用人牙周膜成纤维细胞专用完全培养基(产品货号:CM-H136)作为体外培养人牙周膜成纤维细胞的培养基。

二、细胞培养状态

发货时发送细胞电子版照片

三、使用方法

在技术部标准操作流程下,人牙周膜成纤维细胞可传3-5代左右,随着传代次数的增加,细胞会呈现老化状态,生长速度减缓,3代以内细胞状态最佳;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。

客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;

3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;

4) 细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

四、注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和明舟生物联系,详尽告知细胞的具体情况,以便明舟生物的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

5. 细胞只可用于科研。

备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考